1301人急性T淋巴細胞
1301(人急性T淋巴細胞)
【細胞貨號】 C0003
【細胞縮寫】 1301細胞
【細胞名稱】 1301(人急性T淋巴細胞)
【背景資料】 見細胞說明書
【細胞來源】 細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、1301人急性T淋巴細胞promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國內外著名大學建系
【代次】 P4
【規格】 復蘇T25培養瓶(一瓶)或凍存1ml凍存管(兩支)
【細胞數】 1*10(6)
【生物安全級別】 1
【生物體】 人
【組織來源】 器官:外周血;疾病:急性成淋巴細胞性白血病;內皮
【細胞形態】 T淋巴細胞
【細胞特性】 懸浮
【細胞活力】 95%(Viability by Trypan Blue Exclusion)
【細胞檢測】 細胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌
【培養條件】 詳見細胞說明書
【傳代方法】 建議1:2-1:3 兩天換液一次
【凍存條件】 詳見細胞說明書
【主要文獻】 請具體查閱相關發表文章
如何收集細胞進行實驗檢測
1、應該選用處于對數生長期,狀態良好的細胞用于實驗。
2、細胞應處于70%左右融合,1301人急性T淋巴細胞形態飽滿,折光性好。提前24小時換無血清培養基,避免血清干擾,控制細胞生長速度。
3、選擇適當的分離液,避免所分離的細胞表面受體和其他標記分子被遮蓋。
4、酚紅有類似雌激素作用,為避免類固醇反應,某些檢測使用的細胞要用不加酚紅的培養基。
5、盡量使用傳代數少的細胞進行實驗,原代培養細胞建議在10代以內用于實驗。
6、在轉染實驗中,從細胞種植到轉染后72小時期間,避免使用抗生素。
7、為避免細胞老化和性狀發生改變,請及時凍存細胞。慎重添加生長因子。
8、用于轉染的細胞,轉染前一日應重新鋪板,密度以鋪滿培養器皿60%左右。轉染前4小時重新換液。
9、轉染后48小時即可進行靶基因表達檢測。
培養基的選擇和使用
MEM:成分簡單,貼壁細胞首選。
DMEM:分高糖型和低糖型。
IDMEM:適合細胞密度低,生長困難的細胞。如雜交細胞的篩選,DNA轉染后轉化細胞的篩選培養。
RPM1640:應用最廣泛的培養基之一。懸浮細胞培養首選,主要針對淋巴細胞,也適合其他細胞。
199、109培養基:成分齊全,培養效果較好。
F10培養基:適合小鼠及人類二倍體細胞培養。
F12培養基:適合單細胞分離培養及無血清培養。
McCoy’s5A培養基:特別適合原代細胞及較難培養細胞的生長。
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